QuickGene-Mini480 PÓŁAUTOMATYCZNA IZOLACJA KWASÓW NUKLEINOWYCH

Aparat QuickGene-Mini480 (PDF 4) firmy Kurabo (dawniej FujiFilm, Japonia) to manualny system przeznaczony do szybkiej izolacji DNA/RNA z różnych próbek. Umożliwia on uzyskanie materiału o wysokiej jakości i wysokiej wydajności izolacji, przy minimalnej fragmentacji wyizolowanego materiału. Dzięki prostej konstrukcji, urządzenie zajmuje niewiele miejsca na stole laboratoryjnym (FILM 0).

Po wstępnym przygotowaniu lizatu i umieszczeniu go w kolumnie filtracyjnej, system przeprowadza proces izolacji DNA lub RNA. Odczynniki są dozowane ręcznie za pomocą pipety, a filtracja odbywa się przy użyciu 8 głowic ciśnieniowych. Można jednocześnie przeprowadzać izolację od 1 do 48 próbek, a czas izolacji zależy od sprawności operatora – dla 48 próbek nie przekracza 90 minut (ANIMACJA).

System QuickGene-Mini480 wykorzystuje dedykowane zestawy odczynników, w tym kolumny reakcyjne z membraną filtracyjną o grubości 80 µm. Kwasy nukleinowe o właściwościach hydrofilowych adsorbują się na porowatej membranie, podczas gdy białka i lipidy o właściwościach hydrofobowych są skutecznie usuwane. Proces izolacji odbywa się bez konieczności wirowania – wystarczy zastosować niewielkie ciśnienie na kolumnę. Intensywność tego ciśnienia jest regulowana.

Wysoka czystość wyizolowanych kwasów nukleinowych, osiągająca wskaźnik A260/280 > 1,7 dla DNA i RNA, świadczy o braku zanieczyszczeń, takich jak białka czy sole chaotropowe. Dzięki temu wyizolowane kwasy nukleinowe mogą być używane bezpośrednio w aplikacjach PCR, qRT-PCR, sekwencjonowaniu, genotypowaniu SNP, analizach epigenomicznych oraz farmakogenetycznych. Dodatkowo, zastosowanie ultra cienkich filtrów, wolnych od włókna szklanego, oraz brak potrzeby wirowania podczas oczyszczania gwarantuje ochronę przed mechanicznymi uszkodzeniami matrycy.

Dostępna jest także opcja dokupienia statywów, które umożliwiają pracę z większymi ilościami materiału (np. z 2 ml krwi). Można również wymienić głowicę, umożliwiającą jednoczesną izolację 1-8 próbek. Taki system, znany jako QuickGene-MINI8L (PDF 5) (FILM 5), zapewnia większą wydajność.

Aparaty Kurabo są także wykorzystywane do izolacji RNA SARS-CoV-2 z wymazów, a dostępne zestawy odczynników pozwalają na izolację:

• DNA z FFPE

• DNA z pełnej krwi

• DNA tkankowego (w tym z tkanek FFPE, wymazów z policzka oraz próbek medycyny sądowej)

• DNA plazmidowego

• RNA tkankowego

• RNA z hodowli komórkowych

• RNA z komórek krwi

• RNA wirusa SARS-CoV-2 z wymazów